· TCA通路示踪
项目背景
代谢流是利用稳定同位素示踪技术,检测下游代谢产物的同位素取代形式(M+0/ M+1/ M+2/ …),从而分析出该化合物在代谢通路中的流向和分布。通过对生物体进行代谢流分析,可得到生物体特定代谢通路的活跃程度。
三羧酸循环可以代谢糖类、脂质,以及大部分氨基酸,因为这三类物质都能转换为乙酰辅酶A或三羧酸循环的中间体,从而进入三羧酸循环之中。另外,三羧酸循环的许多中间产物可供生物体利用,当中间产物不足时,可通过填补反应对中间产物进行补充,才能保持三羧酸循环顺利地、不间断地运转。
检测意义
三羧酸循环在肿瘤细胞的代谢中发挥着重要作用,异柠檬酸脱氢酶(IDH1和IDH2)发生突变后,会引起神经胶质瘤和急性髓细胞白血病(AML),通过消耗NADPH将α-KG转化为2-羟基戊二酸(2-HG),使得2-HG在肿瘤细胞和患者体内蓄积。近年来,在心血管风险、白血病、鼻咽癌、前列腺癌、糖尿病肾病和营养状态的相关研究中,都发现血清中三羧酸循环的中间产物有望成为生物标志物。该通路的代谢流分析也一直是研究热点。
检测指标
样品要求
技术优势
我公司可一针定量测定10+种TCA代谢产物的各种同位素取代形式,提供相对定量结果(百分比),覆盖整个三羧酸循环中的重要有机羧酸,方法具有用样量少、灵敏度高、稳定可靠等优点。
应用示例
1)CellMetab丨谷氨酰胺与2-HG
标题:In Vivo Imaging of Glutamine Metabolism to the Oncometabolite 2-Hydroxyglutarate in IDH1/2 Mutant Tumors
摘要:在IDH1和IDH2突变的软骨肉瘤细胞中,可以从谷氨酰胺快速生成2-羟基戊二酸(2-HG),谷氨酰胺是IDH突变肿瘤中2-HG生成的主要碳源。[1-13C]谷氨酰胺可用于非侵入性检测2-HG生成速度。
链接:https://doi.org/10.1016/j.cmet.2017.10.001
2)RapidCommunMassSpectrom丨质谱高通量测定代谢流
标题:A three-minute method for high-throughput quantitative metabolomics and quantitative tracing experiments of central carbon and nitrogen pathways
摘要:通过UHPLC/MS快速分析中心代谢途径、体外和体内追踪实验。
链接:https://doi.org/10.1002/rcm.7834
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